ace® c18-amide
• 用于方法開發的替代選擇性
• 改善極性、酸性、堿性和酚類化合物的分離
• 用于uhplc和hplc的高柱效2μm、3μm、5μm和10μm顆粒
• 超惰性,可獲得蕞佳性能和可重現性
ace c18-amide液相色譜柱
用于提高極性保留和替代選擇性
方法開發的理想色譜柱選擇
■ 相對c18和c8色譜柱,對極性分子 - 特別是酸類,具有替代選擇性
■ 與100%水含量的流動相兼容
■ 用于uhplc、hplc和制備型分離的高柱效2μm、3μm、5μm和10μm顆粒
■ uv和lc/ms兼容性的低流失
*應用
■ 小分子水溶性分析物和極性化合物
■ h鍵給予體、酸類、堿類和酚類化合物
■ 小分子多肽
為什么ace c18-amide液相色譜柱可以提供替代選擇性?
■ ace c18-amide將c18與極性酰胺基結合在單一配體上
■ 延長間隔區技術可以額外延長色譜柱的使用壽命
利用ace c18-amide液相色譜柱的選擇性能力將色譜峰分開
分離度方程可以確定影響分離度的參數:n、α和k。近年來,
重點關注使用超“uhplc”色譜柱(如ace excel 2μm色
譜柱)作為實現分離目標的手段。
然而,選擇性往往被忽視。
在影響分離度的三個參數中,選擇性是為重要的(參見圖1)。
通過利用柱效和選擇性,通常可以實現更好和更快的分離。
ace c18-amide液相色譜柱是ace系列鍵合相的*產品,其可以提供互補選擇性和2μm、3μm、5μm和10μm粒徑的選擇,以開發堅固耐用的uhplc和hplc方法。
圖1 n、α和k對分離度(rs)的影響
對于n = 10,000、k = 4和α= 1.1的典型分離
增加n、α或k可以增加分離度(rs),但是從上圖可以看出,n或k的增加都會迅速降低回報率。增加選擇性(α)則不會發生這個問題,因此其在開發分離方法時是這三個變量中為重要的優化參數。
利用ace鍵合相的固定相選擇性能力將色譜峰分開
圖2闡明了兩種ace鍵合相即c18-amide與c18之間的差異。
盡管這兩種鍵合相均可以提供可能的來自它們各自c18鏈的強疏水作用,但嵌入c18-amide相中的酰胺基會引入額外的相互作用模式,終增加極性化合物的保留并提供替代選擇性。
樣品:1)* 2)兒茶酚 3)2-甲基* 4)4-甲基鄰苯二酚5)3-甲基鄰苯二酚 6)4-硝基鄰苯二酚
流動相:25:75乙腈/27mm h3po4(溶于水中)
色譜柱尺寸:150 x 4.6mm
流速:1.50ml/min
溫度:30℃
波長:270nm
ace c18-amiede液相色譜柱可以使極性選擇性增強
ace c18-amide與刢先c18 uhplc色譜柱的比較
色譜柱尺寸:50 x 2.1mm
樣品:1)* 2)兒茶酚 3)2-甲基* 4)4-甲基鄰苯二酚 5)3-甲基鄰苯二酚 6)4-硝基鄰苯二酚
流動相:25:75甲醇/25mm h3po4(溶于水中)
流速:0.30ml/min
溫度:30℃
波長:214nm
比較數據不代表所有應用。
利用替代選擇性來進行方法開發
酸性、堿性和中性化合物的分離
樣品:1)甲基苯基亞砜 2)吲哚洛爾 3)3-羥基ben甲酸 4)1,2-二甲氧基苯 5)小檗堿 6)楊梅素 7)胡椒堿 8)白楊素
流動相:a = 20mm甲酸銨(溶于水中)(ph 3.0)b = 20mm甲酸銨(ph3.0)(溶于90:10(v/v)甲醇/水中)
梯度:在5分鐘內3 – 100% b
色譜柱尺寸:50 x 2.1mm
流速:0.60ml/min
溫度:40℃
波長:254nm
與100%水含量的流動相兼容
葡萄酒中有機酸的分離
樣品:1)草酸 2)酒石酸 3)蘋果酸 4)乳酸 5)抗壞血酸 6)檸檬酸
流動相:40mm nh4h2po4(溶于水中)(ph 2.5)
色譜柱:ace excel 3 c18-amide, 250 x 2.1mm
流速:0.21ml/min
溫度:25℃
波長:214nm
ace c18-amide可以提供替代選擇性
食品和飲料添加劑 - *
樣品:1)香草酸 2)4-羥基ben甲酸 3)* 4)4-羥基ben甲醛 5)愈創木酚 6)乙基* 7)*
流動相:a = 0.1%甲酸(溶于水中) b = 0.1%甲酸(溶于乙腈中)
梯度:在10分鐘內30 – 55% b
色譜柱尺寸:150 x 4.6mm
流速:1.00ml/min
溫度:40℃
波長:260nm
類固醇
樣品:1)* 2)*龍 3)雌三醇 4)皮質酮 5)11a-羥孕酮 6)11-酮孕酮 7)21-羥孕酮 8)β-雌二醇 9)17α-雌二醇 10)17α-乙炔基雌二醇
流動相:a = 0.1%甲酸(溶于水中) b = 0.1%甲酸(溶于乙腈中)
梯度:在10分鐘內25 – 80% b
色譜柱尺寸:50 x 2.1mm
流速:0.40ml/min
溫度:25℃
波長:260nm
有保證的可重現性和*可擴展性
ace c18-amide的可重現性擴展
樣品:1)* 2)4-羥基ben甲酸 3)乙酰水楊酸 4)ben甲酸 5)2-羥基ben甲酸 6)對羥基ben甲酸乙酯
流動相:35:65乙腈/0.1%tfa(溶于水中)
溫度:22℃
波長:254nm
將可用的2μm、3μm、5μm和10μm粒徑與從uhplc到制備型hplc規模的一系列柱尺寸相結合,可確保方法可重現地放大或縮小。
圖8中的色譜圖顯示,當硅膠批次和硅烷批次改變時可以獲得的可重現性,并當粒徑和柱直徑改變時可以獲得可重現的可擴展性。
產品的可用性和規格
相
官能團
封端
粒徑(µm)
孔徑(å)
表面積(m2/g)
碳載量
大ph范圍
100%水相兼容
usp列表
ace c18-amide
具有完整酰胺極性基團的十八烷基
是
2, 3, 5, 10
100
300
16.4
2.0-8.0a
yes
l1/l60
為了獲得蕞佳色譜柱壽命,*使用2-8的ph范圍。為了在較高的ph值下增加色譜柱壽命,必須考慮有機緩沖液、低緩沖液濃度、高%有機溶劑和低溫。
為了在hplc條件(高達5000psi/350bar)下進一步延長色譜柱壽命,*使用ace保護柱芯柱或ace hplc柱前過濾器。
為了在uhplc條件(高達15000psi/1000bar)下進一步延長色譜柱壽命,*使用ace uhplc柱前過濾器。
對于高達5000psi(350bar)的hplc色譜柱連接器,*使用peek手緊接頭(p/n ace-cc10)。
對于高達15000 psi(1000bar)的uhplc色譜柱連接器,*可重復使用的接頭(p/n exl-cc10)。
ace®是advanced chromatography technologies limited的注冊商標。ace excel™是advanced chromatography technologies limited的商標。advanced chromatography technologies limited承認agilent technologies inc.、phenomenex inc.、thermo fisher scientific和waters corporation的注冊和未注冊商標,且與上述這些公司沒有任何隸屬關系。
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