動(dòng)物血清的定義以及分類(lèi)
動(dòng)物血清的定義：
血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。血清的主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，包括激素、維生素、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、微量元素、擴(kuò)散因子和生長(zhǎng)因子等細(xì)胞增殖和維持的必需成分，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
動(dòng)物血清的分類(lèi)：
1、按來(lái)源動(dòng)物分
常見(jiàn)的血清供體動(dòng)物，主要有牛、馬、豬、兔、雞等。
2、按照牛的年齡分
市場(chǎng)上常見(jiàn)的牛血清，根據(jù)采血時(shí)間不同和血清采制方法分為：又可以分為胎牛、新生牛、小牛血清和成年牛血清：胎牛血清（foetal bovine serum，簡(jiǎn)稱(chēng)fbs）：5-8月未出生胎牛，人工引產(chǎn)胎牛心臟穿刺取血；新生牛血清（newborn calf serum，簡(jiǎn)稱(chēng)nbcs）：出生14小時(shí)內(nèi)未進(jìn)食的新生牛，通常采用頸動(dòng)脈采集血液分離得到的血清；小牛血清（calf serum）：出生后1-12月齡小牛動(dòng)脈采血分離血清；成年牛血清（adult bovine serum，簡(jiǎn)稱(chēng)abs）：一歲以上成年牛，屠宰時(shí)收集全血后分離得到血清。
以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒?guó)家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響，因?yàn)榕Ｑ酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè)，并未有專(zhuān)門(mén)為取血而養(yǎng)的牛。不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來(lái)說(shuō)，年齡越小的牛血清，細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。其中胎牛由于還未接觸外界，血液中所含抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有害的成分最少，血清的質(zhì)量高。根據(jù)血清質(zhì)量從優(yōu)到次排序依次為，胎牛＞新生牛＞小牛＞成年牛。所以目前多數(shù)科研人員選擇胎牛血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
3、按照采集地點(diǎn)分
根據(jù)血源采集地不同，大致又可以分為澳洲、北美、南美及中國(guó)四大類(lèi)。
從血源質(zhì)量、加工工藝、質(zhì)控上區(qū)分，從優(yōu)到次排序依次是澳洲＞北美＞南美＞國(guó)產(chǎn)。特別是生產(chǎn)過(guò)程中，澳洲和北美大多采用靜置分層工藝，對(duì)紅細(xì)胞破壞小，血清中的血紅蛋白和膽紅素較少，顏色呈透明的淡黃色；而南美則大多采用離心收集工藝，紅細(xì)胞破壞較多，血清中血紅蛋白和膽紅素較多，顏色偏紅。
根據(jù)不同品質(zhì)分：
區(qū)分胎牛血清很重要的一點(diǎn)就是血清的內(nèi)毒素含量，內(nèi)毒素含量越低的血清，級(jí)別就越高，以胎牛血清為例：當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10eu/ml時(shí)，此血清為特級(jí)胎牛血清；當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10eu/ml，≤ 25eu/ml時(shí)，此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清；當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25eu/ml時(shí)，此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清；目前，由于同一廠家，不同批次的血清，內(nèi)毒素?cái)?shù)值也可能有較大差異，因此很多血清廠家在名稱(chēng)上已不注明級(jí)別。但使用者仍可通過(guò)檢測(cè)報(bào)告進(jìn)行甄別。
根據(jù)不同處理分：
透析胎牛血清：透析過(guò)濾去除10kd以下小分子（如次黃嘌呤和胸腺核苷），避免外源小分子對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生干擾。適合脈沖示蹤實(shí)驗(yàn)（例如同位素標(biāo)記特定小分子加入到培養(yǎng)體系中，以研究細(xì)胞代謝），也適合轉(zhuǎn)染cho后的篩選等應(yīng)用。去外泌體血清：通過(guò)超速離心法去除絕大部分外泌體的血清，適用于外泌體相關(guān)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究。超低lgg的血清：使用親和層析等工藝，去除igg，使其水平低于標(biāo)準(zhǔn)值，適用于抗體、病毒和病毒反應(yīng)以及細(xì)胞表面抗原表位相關(guān)研究?；钚蕴?葡聚糖處理的血清：可降低血清中類(lèi)固醇激素的濃度，例如雌二醇、孕酮、皮質(zhì)醇、睪酮、t3和t4。適用于相關(guān)激素研究的實(shí)驗(yàn)。
其他動(dòng)物源血清：
馬血清：一般分為兩種：第一種馬血清含有的大分子蛋白比較多，適用于蛋白封閉；第二種馬血清為細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別。經(jīng)過(guò)多次過(guò)濾，去除大多數(shù)大分子蛋白，但保留了血清中促細(xì)胞生長(zhǎng)的活性因子，適用于細(xì)胞培養(yǎng)，例如神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中需要添加馬血清。豬血清：常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。在對(duì)細(xì)胞和活疫苗進(jìn)行支原體檢驗(yàn)中，《獸藥典》明確推薦豬血清作為支原體檢驗(yàn)用液體培養(yǎng)基的組成成分。兔血清：兔血清通常從六個(gè)月或更小的動(dòng)物身上收集，可用于免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫組織化學(xué)中的封閉血清。羊血清：多用做封閉液，也有一些研究人員發(fā)現(xiàn)，優(yōu)質(zhì)的羊血清可用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。雞血清：從屠宰供人類(lèi)食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素b12的放射性同位素稀釋測(cè)定。
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1、按來(lái)源動(dòng)物分
常見(jiàn)的血清供體動(dòng)物，主要有牛、馬、豬、兔、雞等。
2、按照牛的年齡分
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以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒?guó)家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響，因?yàn)榕Ｑ酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè)，并未有專(zhuān)門(mén)為取血而養(yǎng)的牛。不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來(lái)說(shuō)，年齡越小的牛血清，細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。其中胎牛由于還未接觸外界，血液中所含抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有害的成分最少，血清的質(zhì)量高。根據(jù)血清質(zhì)量從優(yōu)到次排序依次為，胎牛＞新生牛＞小牛＞成年牛。所以目前多數(shù)科研人員選擇胎牛血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
3、按照采集地點(diǎn)分
根據(jù)血源采集地不同，大致又可以分為澳洲、北美、南美及中國(guó)四大類(lèi)。
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其他動(dòng)物源血清：
馬血清：一般分為兩種：第一種馬血清含有的大分子蛋白比較多，適用于蛋白封閉；第二種馬血清為細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別。經(jīng)過(guò)多次過(guò)濾，去除大多數(shù)大分子蛋白，但保留了血清中促細(xì)胞生長(zhǎng)的活性因子，適用于細(xì)胞培養(yǎng)，例如神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中需要添加馬血清。豬血清：常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。在對(duì)細(xì)胞和活疫苗進(jìn)行支原體檢驗(yàn)中，《獸藥典》明確推薦豬血清作為支原體檢驗(yàn)用液體培養(yǎng)基的組成成分。兔血清：兔血清通常從六個(gè)月或更小的動(dòng)物身上收集，可用于免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫組織化學(xué)中的封閉血清。羊血清：多用做封閉液，也有一些研究人員發(fā)現(xiàn)，優(yōu)質(zhì)的羊血清可用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。雞血清：從屠宰供人類(lèi)食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素b12的放射性同位素稀釋測(cè)定。
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